База данных по химическим эффектам в химических патентах

СОВРЕМЕННЫЕ ИММУНОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕСТИЦИДОВ И ЭНДОКРИННЫХ ДЕСТРУКТОРОВ /Нартова Ю.В., Дергунова Е.С., Еремин С.А., Ермолаева Т.Н. / Липецкий государственный технический университет, 398600, г.Липецк, ул. Московская, 30 ermolaeva@stu.lipetsk.ru [18 Менд.съезд, 2007, т.4. с.188]
Разработан комплекс методик для определения пестицидов (ацетохлор, бутахлор, алахлор, алдрин, диалдрин, изопротурон, 2,4-Д, имидаклоприд) и эндокринных деструкторов (нонил-фенол и его структурные аналоги, линейные алкилбензолсульфонаты, бисфенол А) в объектах окружающей среды и пищевых продуктах с применением пьезокварцевых иммуносенсоров и методом поляризационного флуоресцентного иммуноанализа (ПФИА). Изучено влияние способов иммобилизации биорецепторных молекул на величину сигнала пьезокварцевого иммуносенсора и массу биослоя. Для активации поверхности металлических электродов рекомендованы покрытия, полученные методом самособирающихся монослоев на основе силоксановых и тиольных соединений. Стабилизация биослоя наблюдается при ковалентной пришивке гаптен-белковых конъюгатов бифункциональными реагентами (глутаровый альдегид, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимид и др.) или при закреплении молекул аналита на поверхности сенсора с помощью фотополимеризации. Показано влияние природы белковой молекулы (BSA, OVA, STI) в составе конъюгата на устойчивость покрытия в жидких средах и чувствительность определения токсикантов с помощью пьезокварцевого иммуносенсора. На основании комплексного изучения поведение иммуносенсоров в жидких средах установлена роль факторов, определяющих селективность и чувствительность детектирования пестицидов и эндокринных деструкторов. Выбор комплементарных пар иммунореагентов осуществлен с учетом констант аффинности (КАф), рассчитанных по методике Скэтчарда. Показана зависимость предела обнаружения токсикантов от значения КАф. Селективность определения пестицидов и эндокринных деструкторов с помощью пьезокварцевого иммуносенсора подтверждена значениями коэффициентов перекрестного реагирования (CR,%). Исследовано влияние структуры и степени очистки трейсера (аналит, меченый флуоресцентной меткой) на аналитический сигнал, чувствительность и специфичность определения пестицидов методом ПФИА. Рассчитаны константы связывания трейсер-антитело и антиген-антитело и выбраны оптимальные пары иммунореагентов для определения пестицидов методом поляризационного флуоресцентного иммуноанализа. Разработанные методики апробированы при определении остаточных количеств токсикантов в объектах окружающей среды (вода, почва), пищевых продуктах (колбасные изделия, рис, молоко, яблочный сок), стиральных порошках и полимерных материалах. Предел обнаружения ацетохлора, бутахлора, алахлора, алдрина, диалдрина, изопротурона, 2,4-Д, имидаклоприда методом поляризационного флуоресцентного иммуноанализа составляет 8 – 10 нг/мл, нонилфенола, бисфенола А, линейных алкилбензолсульфонатов с помощью пьезокварцевых иммуносенсоров – 0,5 – 1,0 нг/мл.
| C07C, C07D, c08s, c40em, c44ia, c48la, c91ps
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ и администрации Липецкой области (грант № 06-03-96339 _р_центр_а).