|
База данных применения химических эффектов |
На главную страницу | О проекте | Контакты |
Новости | База данных | Статьи |
Вы находитесь здесь: dace.ru / База данных химических эффектов База данных по химическим эффектам в химических патентах
Все патенты, начинающие с Э
ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИЕ СЕНСОРЫ ДНК-БЕЛОК
НОВЫЕ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИЕ СЕНСОРЫ ДЛЯ РЕГИСТРАЦИИ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ ДНК-БЕЛОК / Евтюгин Г.А.а, Порфирьева А.В.а, Будников Г.К.а, Хианик Т.б / аКафедра аналитической химии Казанского государственного университета, 420008, Казань, Российская Федерация /бDepartment of Nuclear Physics and Biophysics, Comenius University, Mlynska dolina F1, 842 48 Bratislava, Slovaki
[18 Менд.съезд, 2007, т.4, с.132] Взаимодействия нуклеиновых кислот с белками играют важную роль в регуляции биосинтеза белков и передачи генетической информации. Многие белки, специфически связывающиеся с ДНК, выступают также в качестве маркеров различных заболеваний и патологий. Для регистрации указанных белков предложен новый сенсор на основе стеклоуглеродного электрода, покрытого электрополимеризованными материалами (полианилин, полифенотиазины). Аналитическим сигналом служит изменение потенциала сенсора, измеряемое после сдвига рН до и после контакта с белком. С помощью данного ДНК-сенсора разработаны способы определения аутоантител, вырабатываемых в крови больных системной красной волчанкой и аутоиммунным тиреоидитом, отличающиеся упрощенной процедурой измерения сигнала и малым объемом сыворотки крови (менее 10 мкл). Установлены диагностические критерии заболеваний и специфичность сигнала в отношении аутоиммунных антител различной этиологии. Сопоставление с данными иммуноферментного определения IgG показало, что наибольшая селективность сигнала ДНК-сенсора достигается в присутствии в поверхностном слое полимерной формы метиленового синего. Денатурация ДНК перед включением в состав биосенсора, как и термическая обработка сывороток, позволяют выделить вклад антител различной этиологии в сигнал биосенсора. Изучение влияния ДНК и белков на процессы переноса заряда в поверхностном слое, проведенное методом электрохимического импеданса в присутствии маркера [Fe(CN)6]3-/4-, показало, что изменение потенциала сенсора связано с закономерными изменениями емкости и сопротивления поверхностного слоя. В результате смещения рН-зависимых равновесий окисления/восстановления полианилина и полифенотиазинов происходит закономерное изменение прочности связывания антител и заряда поверхностного слоя, что обусловливает характер рН- и концентрационной зависимости сигнала ДНК-сенсора. Включение в состав сенсора вместо нативной ДНК аптамера 5’-GGT TGG TGT GGT TGG TTT TTT TTT TTT TTT TT-3’ позволило получить сигнал на 1-100 нМ тромбина. Методом пьезокварцевого микровзвешивания установлена корреляция сигнала ДНК-сенсора с параметрами связывания тромбина и специфичность отклика в присутствии мешающих белков. Показано, что изменение потенциала обусловлено влиянием электростатического заряда комплекса аптамер-тромбин на равновесный потенциал полифенотиазинов и процессы допирования полианилина. Кроме того, в области малых концентраций тромбина заряд поверхностного слоя влияет на конформацию аптамера и его рецепторную активность. По сравнению с пьезокварцевым микровзвешиванием, потенциометрический способ измерения сигнала обеспечивает более высокую чувствительность и меньшее влияние неспецифических взаимодействий белков (на примере альбумина человека). | C07B, c05el, c44ia, c90es Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант № 06-03-32217). |
dace.ru © 2005-2024 гг. Сделано dkos.ru |